在医学院校,不管是教学还是科研工作,洁净室是必备的实验条件之一。其中实验教师以及研究生更是使用洁净室的主力军。但在教学过程中发现,很多教师和研究生对如何正确使用洁净室还存在很多误区,本文将从洁净室的概念、要求、监测方法、使用注意点几个方面综合阐述如何正确使用洁净室。
1、什么是洁净室
首先高校师生对洁净室的概念存在误区,大部分师生都称之为无菌室,事实上绝对无菌的空间是很难获得的,更专业的称呼如题名应该叫“洁净室”。那什么样的空间可以称之为洁净室呢?以下从概念、状态、气流形式、分级几个方面来阐述。同时引申一个问题,洁净到什么样的程度才可以符合实验要求?
洁净室是对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间和区域,其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域污染的介入、产生和滞留的功能。其他相关参数如温度、湿度、压力也有必要控制。
2、洁净室的要求
洁净室等级:洁净度是指洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径悬浮粒子的统计数量来区分的洁净程度。
根据《中国药典》(2010)规定,无菌检查应在环境洁净度10000级,局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行,对于医学院校的生物实验,如无特殊规定也都按这个要求,也就是通常所见10000级实验室套100级超净台的设计。
3、洁净室的监测
洁净室需要控管的项目包括温度、湿度、静压差、风速、微粒、浮游菌、沉降菌等。当然在设计之初还有噪音、光照度、安全、节能等方面的考虑。对于使用者来说使用过程中学会日常监测非常重要,这是保证教学科研工作的前提之一,也有利于在出现异常数据时排查原因。
温度、湿度、静压差、风速是预测试指标,只有这些指标都在规定范围内,后续三个主测试指标的监测才有意义。温湿度要求使用者可以自己把握,如无特殊要求时,温度在18~26℃,相对湿度在45%~65%为宜。洁净室与非洁净室之间的静压差应>10 Pa;相邻不同洁净级别的洁净室之间的压差应>0.5 Pa;洁净区与室外压差应>12 Pa。单向流净室实测室内平均风速应大于设计风速,但不应超过15%。以上测试可以通过温湿度仪、微压计、风速仪来完成。
悬浮粒子测试可以通过微粒计数仪来完成。监测时首先用面积开根号的方法确定最少采样点数目,学校生物实验室都比较小,一般每间3~4个点就够了,采样时需注意采样点在室内均匀分布并尽量避开回风口,采样管口应正对气流方向,高度约离地80cm,测试人员应在采样口的下风侧,并尽量减少活动。为保证仪器下次能正常使用,采样完毕一定启动仪器的自净程序。
洁净室启用之初应每周监测,如果数据稳定,适当延长周期,但建议至少每3个月监测1次。每次实验时超净台及洁净室内都应当放置沉降菌平板,相当于一个实验环境的阴性对照,而对于微生物实验,尤其是细菌总数,只有在监测数据符合对应等级的洁净室要求时数据才有效。
4、使用洁净室的注意事项
严格控制进出洁净室的人员,做好门禁管理,只有有实验需求的师生方可进入,谢绝一切不必要的参观。进出实验室严格按照设计路径。
使用洁净室之前先打开净化空气调节系统和紫外灯,至少运行30 min;实验相关物品经传递窗紫外灯照射30 min后进入实验室,物品准备齐全,避免实验过程中反复进出实验室增加污染几率;进入洁净室必须换鞋、更衣、带好口罩帽子,帽子必须将头发全部遮住然后风淋进入缓冲区,最后进入实验室。值得一提的是,使用者如果患有呼吸道疾病或皮肤疾病尽量不要进入洁净室,以免影响实验结果。
实验过程中严格无菌操作,避免喧哗、吵闹,更不能饮水,吃东西,与实验不相关的东西不得带入实验室。
实验结束彻底清洁消毒,紫外灯消毒30 mim。师生们需要注意的是紫外灯使用是有寿命的,做好紫外灯使用记录,如果有紫外灯强度计日常监测那就更好了。
不管是科研还是教学,实验数据的真实性一直是我们不懈追求的目标。在洁净室完成的生物实验一旦污染自然前功尽弃,对于微生物实验来说,还可能造成严重的结果偏离,影响教学科研质量。